痰热清注射液抑制白血病细胞体外增殖及其作用机制

R733.7; 目的:探讨痰热清注射液对人白血病细胞体外增殖的影响及其作用机制.方法:将痰热清注射液以体积比稀释成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256和1∶512,共9个浓度组,分别处理增殖期慢性髓系白血病K562细胞和急性T淋巴细胞白血病Molt4细胞,镜下观察不同时间点各浓度组细胞生长情况,应用活细胞计数试剂盒检测细胞增殖能力,绘制生长曲线,计算抑制率和半数抑制浓度(halfinhibitory concentration,IC50);分别采用碘化丙啶染色法和碘化丙啶/膜联蛋白Ⅴ双染法,通过流式细胞术检测Molt4细胞周期及凋亡的变化;采用实时定量聚合酶链反应方法分析痰热清注射液处理M0lt4细胞后凋亡相关基因caspase-3和bcl-2的表达量变化.结果:痰热清注射液对K562和Molt4细胞增殖具有抑制作用,1∶2至1∶16稀释浓度组的细胞毒性大,细胞基本死亡;抑制作用呈剂量和时间依赖性,IC50分别为1∶333和1∶142稀释浓度.痰热清注射液1∶32浓度组处理72 h后,Molt4细胞处于S期的数量明显减少(P＜0.05),凋亡细胞比例明显增加(P＜0.05);同时,caspase-3表达增加,bcl-2表达明显减少(P＜0.05).结论:痰热清注射液可抑制白血病细胞体外增殖并促进其凋亡,该作用可能是通过减少S期细胞数量,下调bcl-2基因表达和上调caspase-3基因表达而实现的.