雪松疫霉(Phytophthora lateralis)的快速分子检测

S41-30; 由雪松疫霉(Phytophthora lateralis)引起的疫病是一类植物检疫性病害.为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了雪松疫霉和其他疫霉的tRNA序列,在此基础上设计了一对检测雪松疫霉的特异性引物T1/T2,该对引物从雪松疫霉中扩增得到1条192 bp的条带,而其他15种疫霉和其他真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对雪松疫霉具有特异性.在25 μL PCR反应体系中,引物T1/T2检测灵敏度为10 pg基因组DNA;而以引物T3/T4和T1/T2进行巢式PCR扩增,能够检测到1fg基因组DNA,使检测灵敏度提高了10 000倍.该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测...

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Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:	植物病理学报 2014, Vol.44 (2), p.113-120
Hauptverfasser:	纪睿, 王健生, 廖太林, 李百胜, 张正光, 郑小波
Format:	Artikel
Sprache:	chi
Online-Zugang:	Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:	S41-30; 由雪松疫霉(Phytophthora lateralis)引起的疫病是一类植物检疫性病害.为建立该病原菌的快速检测技术,本文比较分析了雪松疫霉和其他疫霉的tRNA序列,在此基础上设计了一对检测雪松疫霉的特异性引物T1/T2,该对引物从雪松疫霉中扩增得到1条192 bp的条带,而其他15种疫霉和其他真菌菌株均无扩增条带,表明该对引物对雪松疫霉具有特异性.在25 μL PCR反应体系中,引物T1/T2检测灵敏度为10 pg基因组DNA;而以引物T3/T4和T1/T2进行巢式PCR扩增,能够检测到1fg基因组DNA,使检测灵敏度提高了10 000倍.该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0.5个游动孢子,对人工接种发病的植物组织能够特异性地检测到该病原菌.此外,进一步建立了该病原菌的实时荧光定量PCR检测体系.
ISSN:	0412-0914