通窍活血汤含药脑脊液抑制星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的机制研究

目的 探讨通窍活血汤含药脑脊液(TQHXD-CSF)对星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的影响以及其调控IL-33/肿瘤发生抑制蛋白(ST)2信号通路相关机制.方法 将体外培养的星形胶质细胞按随机数字表法分为正常组(含20％正常脑脊液)、模型组(含20％正常脑脊液)、TQHXD-CSF组(含20％TQHXD-CSF)和跨膜型ST2(ST2L)中和抗体+TQHXD-CSF组(含20％TQHXD-CSF+5、10、20 μg/mL ST2L中和抗体);除正常组外,其余各组均按星形胶质细胞机械性损伤模型构建方法处理细胞.在倒置显微镜下观察细胞形态,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性,ELISA法检测细胞上清液IL-33、ST2L、IL-1β及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,Western blot、qRT-PCR法分别检测细胞IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平.结果 与正常组比较,模型组星形胶质细胞出现反应性增生改变,细胞活性及TGF-β1水平均明显降低(均P＜0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显升高(均P＜0.05);与模型组比较,TQHXD-CSF组细胞形态明显改善,细胞活性及TGF-β1水平均明显升高(均P＜0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显降低(均P＜0.05).与TQHXD-CSF组比较,ST2L中和抗体(5、10、20 μg/mL)+TQHXD-CSF组IL-1 β水平均明显降低(均P＜0.05),ST2L中和抗体(10、20 μg/mL)+TQHXD-CSF组TGF-β1水平均明显升高(均P＜0.05).结论 TQHXD-CSF能够抑制星形胶质细胞机械性损伤后的炎症反应,其作用机制可能与下调IL-33/ST2信号通路有关.