环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因Staufen在小鼠海马的原位杂交定位

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因Staufen在小鼠海马的原位杂交定位

目的：依据环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因STAUFEN蛋白序列寻找与人类亲缘关系较近的动物模型,并在动物模型的脑组织上进行Staufen1 mRNA的定性和定位.方法：查找相关动物的STAUFEN蛋白序列,构建生物进化树,寻找合适的动物模型.采用反转录PCR扩增Staufen1片断,接入载体制作亚克隆,转化细菌后筛选、扩增、抽提,然后测序鉴定.体外转录Staufen1基因mRNA探针,将其和脑组织冰冻切片原位杂交、显色.结果：生物进化树提示,小鼠与人的Staufen1的蛋白序列相似性达99.7%;原位杂交结果显示,小鼠海马CA1、CA2、CA3和DG区存在Staufen1 mRNA的表达.结...

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Veröffentlicht in:浙江大学学报（医学版） 2014, Vol.43 (1), p.66-70
1. Verfasser: 李国政 郭晶晶 彭从斌
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
cAMP反应元件结合蛋白质
代谢
原位杂交
基因
小鼠
海马
蛋白质类
转录因子
逆转录聚合酶链反应
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的：依据环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因STAUFEN蛋白序列寻找与人类亲缘关系较近的动物模型,并在动物模型的脑组织上进行Staufen1 mRNA的定性和定位.方法：查找相关动物的STAUFEN蛋白序列,构建生物进化树,寻找合适的动物模型.采用反转录PCR扩增Staufen1片断,接入载体制作亚克隆,转化细菌后筛选、扩增、抽提,然后测序鉴定.体外转录Staufen1基因mRNA探针,将其和脑组织冰冻切片原位杂交、显色.结果：生物进化树提示,小鼠与人的Staufen1的蛋白序列相似性达99.7%;原位杂交结果显示,小鼠海马CA1、CA2、CA3和DG区存在Staufen1 mRNA的表达.结论：小鼠是研究Staufen1基因在海马转录的合适动物模型.
ISSN:1008-9292
DOI:10.3785/j.issn.1008-9292.2014.01.017