依曲替酸诱导上皮鳞癌细胞凋亡及相关信号途径的改变

目的：研究依曲替酸诱导上皮鳞癌细胞凋亡及其分子机制。方法：用MTT法观察依曲替酸对A431细胞的生长影响，电镜观察细胞形态，流式细胞仪检测凋亡峰的出现，Annexin-V染色证实凋亡的发生。同时用逆转录PCR法观察，经依曲替酸作用不同的时间后，A431细胞中信号传导和转录激活因子3（STAT3）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、p42／44丝裂原激活的蛋白激酶（p42／44MAPK）mRNA表达的改变；用蛋白印迹术，研究经依曲替酸作用不同的时间对A431细胞中磷酸化STAT3（p-STAT3）、CyclinD1蛋白表达的影响。结果：①随着依曲替酸作用时间的延长及剂量的增加，对A431细胞增殖的抑制作用增加。流式细胞仪检测显示，亚G1期凋亡峰明显增加，电镜观察和Annexin-V染色证实了凋亡的存在。②依曲替酸能明显抑制A431细胞中STAT3、CyclinD1 mRNA表达的改变，随着作用时间的延长，抑制作用增强，P〈0．05；并下调p-STAT3、CyclinD1蛋白的表达；下调p42／44MAPK mRNA的表达。③经依曲替酸作用后，A431细胞中CyclinD1 mRNA表达的下降与STAT3 mRNA表达的下降呈正相关，P〈0．05；p-STAT3、CyclinD1蛋白也同步下调，P〈0．05；而CyclinD1 mRNA表达的下降与p42／44MAPK mRNA的下调无相关性。结论：①依曲替酸具有抗上皮鳞癌细胞生长及诱导上皮鳞癌细胞凋亡作用。②依曲替酸抗上皮鳞癌细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡的机制，可能主要是通过调节JAK／STAT3信号途径而实现的。