血清4型禽腺病毒浙江株的分离鉴定及其全基因组序列分析

S855.3; 对2015年浙江省某鸡场疑似心包积液-肝炎综合征的患病鸡进行病原检测和分离鉴定,并对分离到的禽腺病毒全基因组进行遗传进化分析.采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增结合核酸测序分析确定其病原为血清4型禽腺病毒(FAdV4);通过鸡胚接种和原代鸡胚肾(chicken embryo kidney,CEK)细胞多次传代培养,获得FAdV4细胞适应毒株ZJ2015.血凝实验显示:ZJ2015株不能凝集小鼠、大鼠、鸡和绵羊的红细胞,间接免疫荧光分析表明其半数组织培养感染剂量(50％tissue culture infective dose,TCID50)为2.0×106 mL-1.以0.2 mL/枚剂量接种鸡胚,该毒株能100％致死鸡胚,且致死鸡胚胚体潮红、肝肿大、出血等.将FAdV4全基因组分11段分别进行PCR扩增和测序,获得跨越ZJ2015毒株的全基因组序列(GenBank登录号:MF521611.1),对其全基因组、hexon和fiber-2基因的氨基酸进行遗传进化分析显示:ZJ2015毒株与近几年国内流行的FAdV4强毒株处于同一个分支上,同源性达到99.87％以上;与ON1、KR5、MX-SHP95等较早毒株相比,ZJ2015具有1966 bp的大段缺失及Fiber-2蛋白上多个位点的突变.浙江毒株ZJ2015的分离可为进一步开展FAdV4的诊断防控技术和毒力变异机制的研究奠定基础.