草鱼脂肪酸结合蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：根据GenBank上已发表的其他物种的脂肪酸结合蛋白（fatty acid-binding protein, FABP）基因序列设计1对引物，从草鱼（ Ctenopharyngodon idellus ）cDNA文库中扩增出脂肪酸结合蛋白基因，定向克隆于表达质粒载体pET32A中构建成pET32A-FABP重组体，将重组体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，以终浓度1mmol·L^-1的IPTG对其进行诱导表达，表达产物经SDS-PAGE电泳分析表明，与阴性对照相比，阳性克隆在分子量33kDa处有1条明显的蛋白带，大小与预期结果一致，经光密度分析可知，目的蛋白约占总可溶性蛋白的49.5％，这为进一步研究脂肪酸结合蛋白生物学特性以及FABP基因对脂肪代谢调控规律奠定了基础。