白细胞介素6在体外诱导Barrett食管细胞发生上皮间质转变中的作用

目的探讨白细胞介素6（IL-6）在体外诱导Barrett食管细胞株（CP-D）发生上皮问质转变（EMT）中的作用。方法应用0、10、20、50、100μg／L不同浓度梯度IL-6刺激CP-D细胞，然后采用光学显微镜观察细胞形态学变化，划痕实验、transwell实验检测CP-D细胞的侵袭和迁移能力变化，实时荧光定量-PCR、蛋白质印迹和免疫荧光检测CP-D细胞中上皮细胞标志物E-钙黏附蛋白、间质细胞标志物波形蛋白表达情况。结果不同浓度梯度IL-6刺激CP-D24h后致其极性丧失，细胞间的黏附连接减少。划痕实验计数24h迁移细胞数，10、20、50、100μg／L组均高于0μg／L组（328±47、347±59、483±62、492±55比131±22，均P〈0．05）。transwell实验证明，10、20、50、100μg／LIL-6组迁移过膜的细胞数目均高于0μg／L组（62±11、67±15、97±12、99±13比13±5，均P〈0．05）。荧光定量实时PCR的结果提示，50μg/L组E-钙黏附蛋白mRNA相对表达量低于20μg／L组（0．47±0．16比0．79±0．07，P=0．012），而波形蛋白mRNA相对表达量则高于20μg/L组（1．78±0．37比1．43±0．15，P=0．026），蛋白质印迹与PCR结果一致，均提示50μg/L为IL-6刺激致CP-D细胞发生EMT的最适浓度。结论IL-6刺激可致CP-D细胞发生EMT，同时使CP-D细胞侵袭，迁移能力增强，促进其发生恶变。