独立生长因子1对小鼠骨髓多能造血干细胞增殖和凋亡的调控

目的探讨骨髓多能造血干细胞中独立生长因子1（Gfi—I）的表达与细胞凋亡和增殖间的关系，观察Gfi-1及其突变型对骨髓多能造血干细胞的不同效应，进一步研究Gfi-1对造血干细胞的调节机制。方法用质粒转导技术使正常小鼠骨髓多能造血干细胞（32D细胞）高表达Gfi-1基因及其突变型（N382S），以流式细胞仪检测细胞凋亡率，以Western印迹检测细胞中Gfi-1、凋亡途径信号分子Bax、信号转导子和转录激活3（STAT3）蛋白的表达水平。结果培养48、96、144h时Gfi-1组的细胞凋亡率分别为4．0％±1．8％、7．0％-4-1．6％和10．O％±2．4％，明显低于对照组（6．0％±1．0％、11．0％±1．5％、23．0％±1．5％，均P〈0．05）；N382S组细胞凋亡率分别为5．0％4-1．3％、12．0％-4-2．1％、21．0％±2．2％，与对照组差异无统计学意义（P〉0，05）。培养48、96、144h时Gfi-1组的细胞数量分别为0．96×10^6、2．03×10^6、3．47×10^6，明显低于对照组（1．42×10^6、3．26010^6、6．12×10^6，均P〈0．05）；N382S组细胞数量分别为1．51×10^6、3．36×10^6、6．54×10^6，与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。Gfi-1组Bax蛋白表达水平低于空载体对照组（1．090-4-0．062比1．707±0．025），STAT3蛋白表达水平高于对照组（1．723-4-0．168比1．203±0．168）（均P〈0．05）；N382S组Bax蛋白表达水平（1．7104±0．062）与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），STAT3蛋白表达水平（1．7974-0．292）高于对照组（P〈0．05）。结论Gfi-1不仅抑制细胞凋亡，也抑制细胞增殖；它可能通过抑制Bax的表达而抑制32D细胞的凋亡；Gfi-1同时会影响STAT3的表达但其锌指结构对于STAT3表达影响意义不大，提示Gfi-1在造血干细胞方面有着独特而复杂的作用。