癌胚抗原启动子驱动双自杀基因对裸鼠大肠癌移植瘤的作用

目的探讨癌胚抗原启动子（cp）驱动的双自杀基因系统Cp-CDglyTK对裸鼠大肠癌移植瘤的治疗作用。方法pcDNA3．1（-）Cp—CDglyTK质粒转染癌胚抗原阳性的SW480细胞和癌胚抗原阴性的HeLa细胞，反转录PCR检测目的基因的表达；给予不同浓度的前体药物5氟胞嘧啶（5-FC）及更昔洛韦（GCV）处理，用四甲基偶氮唑盐（MTr）法评估杀伤效应和旁观者效应。96只裸鼠在右侧腋窝皮下移植SW480细胞，72只移植HeLa细胞，建立大肠癌移植瘤模型。前体药物治疗实验中，取SW480和HeLa移植瘤裸鼠各48只，各分4组（I-Ⅳ，V～Ⅷ组，n=12），分别瘤体注射磷酸盐缓冲液（PBS）、GCV联合5-FC，腹腔注射PBS、GCV联合5-FC。自杀基因联合前体药物治疗实验中，余下48只SW480移植瘤裸鼠分为Ⅸ～Ⅻ组（n=12），24只HeLa移植瘤裸鼠分为ⅪIl～Ⅲ组（n=12），均经瘤体注射脂质体Lipofectamine@和质粒Cp—CDglyTK，再由腹腔注射药物（Ⅸ组：PBS，X组GCV，XI组：5-Fc，Ⅻ组：GCV联合5．FC，Ⅻ组：PBS，m组：GCV联合5-FC）。记录肿瘤体积、最终肿瘤重量和生存时间，比较分析各组裸鼠的治疗效果。结果转染质粒的SW480细胞有CDglyTK基因的表达，GCV联合5-FC对转染质粒的SW480细胞的抑制率（59．87％4-0．21％）明显高于HeLa细胞（9．90％±0．09％，P〈0．01），GCV与5-Fc联合用药对转染质粒的SW480细胞的生长抑制率和旁观者效应大于单一使用GCV或5-Fc（均P〈0．05）。II、IV、VI、Ⅷ组分别与对照组I、Ⅲ、V、Ⅶ组比较，肿瘤体积、最终瘤重和生存期差异均无统计学意义（均P〉0．05）。Ⅻ组最终肿瘤体积和最终瘤重均小于Ⅸ组、X组和Ⅺ组[（150．0±3．2）比（522．5±1．9）、（256．8±10．4）和（260．7±2．2）mm，（54．1±10．4）比（682．0±12．O）、（251．8±15．1）和（271．6±17．7）mg，均P〈0．05]；Ⅻ组的肿瘤生长抑制率和生存时间大于X组和Ⅺ组[92．1％比63．1％、60．2％，（25．7±0．8）比（21．8±0．5）、（18．0±0．9）d，均P〈0．05]。Ⅲ和）皿组肿瘤体积、最终瘤重和生存时间差异均无统计学意义（均P〉0．05），刖组的肿瘤生长抑制率仅