他克莫司对重型再生障碍性贫血患者效应T细胞抑制作用的研究

目的体外观察他克莫司（FK506）对重型再生障碍性贫血（SAA）患者骨髓CD8＋HLA-DR＋T细胞的抑制作用，SAA患者效应T细胞功能与临床的相关性，进一步探讨SAA的免疫发病机制。方法选取2012年2至9月天津医科大学总医院血液科收治的SAA患者16例，免疫磁珠分选患者骨髓CD8＋HLA-DR＋T细胞，分别加入不同浓度白细胞介素2（IL-2）、FK506，培养72h用光密度法测培养孔细胞增殖；用淋巴分离液分离上述SAA患者骨髓T淋巴细胞，分别加入IL-2、FKS06、环孢素（CsA），并设对照组（不加任何刺激因子），共培养18h加入佛波酯等活化4h，用流式细胞仪测CD8＋HLA-DR＋T细胞内肿瘤坏死因子β（TNF-β）蛋白表达水平；并进一步分析TNF-β表达量与外周血象及CD4＋／CD8＋T细胞比例的关系。结果当IL-2浓度≥20U／ml时，反应细胞增殖[吸光度（A）值：0．538±0．142]明显高于对照孔（0．505±0．153）（P〈0．05）；加入FKS06后，4值降低为（0．386±0．124）（P〈0．05）。IL-2组细胞内TNF-β蛋白表达（73．36％±16．73％）明显高于空白对照组（66．61％±16．20％），FK506组与FK506＋CsA组TNF-β蛋白表达（47．78％±20．09％、42．23％±21．35％）明显低于空白对照组（均P〈0．05），但是FK506＋CsA组与FK506组间差异无统计学意义（P〉0．05）。TNF-β表达量与患者外周血网织红细胞比例呈负相关，与患者外周血淋巴细胞百分比呈正相关，与患者CD4＋／CD8＋T细胞呈负相关（r=一0．86、0．77、一0．90，均P〈0．05）。结论IL＋2能促进SAA患者CD8＋HLA-DR＋T细胞增殖，FK506能抑制此增殖作用；IL-2能促进CD8＋HLA-DR＋T细胞分泌高水平的TNF-β，FK506能抑制其分泌；FK506联合CsA对CD8＋HLA-DR＋T细胞抑制作用与单用FK506作用相当。