局部RNA干扰下调磷脂酰肌醇3激酶-Akt信号通路抑制大鼠颈静脉颈动脉间置模型静脉移植血管新生内膜增生

R3; 目的 探讨局部干扰磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)p110β亚单位对移植血管新生内膜增生的作用.方法 大鼠颈静脉分支-颈动脉间置模型,通过Pluronic F-127-质粒缓释系统在血管吻合完成后局部RNA干扰.分6组:第1组:25%Pluronic F-127组,第2组:pU6-Pik3cb-shRNA-1组,第3组:pU6-Pik3cb-shRNA-2组,第4组:1/2(shRNA 1+shRNA 2)组,第5组:pGenesil-1质粒错配shRNA组,第6组:渥曼青霉素阳性对照组.实验时分别将200 μl含有50μg shRNA质粒,或50μg渥曼青霉素,或空白Pluronic F...

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Veröffentlicht in:中华医学杂志 2007, Vol.87 (24), p.1713-1716
Hauptverfasser: 邓勇志, 刘苏健, 马丽, 孙宗全, 陈家军, 苏刚, 刘超, 王国华, 柯俊
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:R3; 目的 探讨局部干扰磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)p110β亚单位对移植血管新生内膜增生的作用.方法 大鼠颈静脉分支-颈动脉间置模型,通过Pluronic F-127-质粒缓释系统在血管吻合完成后局部RNA干扰.分6组:第1组:25%Pluronic F-127组,第2组:pU6-Pik3cb-shRNA-1组,第3组:pU6-Pik3cb-shRNA-2组,第4组:1/2(shRNA 1+shRNA 2)组,第5组:pGenesil-1质粒错配shRNA组,第6组:渥曼青霉素阳性对照组.实验时分别将200 μl含有50μg shRNA质粒,或50μg渥曼青霉素,或空白Pluronic F-127凝胶均匀地涂在移植桥血管的周围.每组30只SD大鼠,分别于1、3、7、14、28 d取材苏木精-伊红染色观察内膜厚度;术后3 d进行荧光定量PCR和Western印迹法测定PI3K p110β亚单位mRNA和其下游效应分子磷酸化Akt和mTOR.结果 Pluronic F-127质粒缓释系统平滑肌细胞转染效率为60%,内皮细胞达90%以上,pU6-Pik3cb-shRNA和渥曼青霉素转染后Pik3cb mRNA和其下游效应分子磷酸化Akt和mTOR下调,移植血管内膜增生减轻.结论 靶向Pik3cb的shRNA下调PI3K-Akt-mTOR信号通路,减轻移植血管新生内膜增生.
ISSN:0376-2491
DOI:10.3760/j:issn:0376-2491.2007.24.016