应用RNA干扰技术抑制乙型肝炎病毒抗原表达的实验研究

应用RNA干扰技术抑制乙型肝炎病毒抗原表达的实验研究

R37; 目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区的siRNA表达载体pSIHBV/C,观察其对HBV复制和表达的影响.方法将构建成功的pSIHBV/C与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV1.3共转染HepG2细胞,转染后24、48、72 h,用Abbott试剂检测细胞上清中HBsAg和HBeAg,并用免疫荧光染色法观察细胞内病毒核心抗原和表面抗原的表达.结果成功构建了针对HBV核心区的siRNA表达载体pSIHBV/C,并发现它能明显抑制HBsAg和HBeAg的分泌,转染后第2天抑制率达高峰,分别为92%、85%,而随机序列的siRNA无此作用.免疫荧光染色结果也证实转染24 h后,随pSI...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:中华医学杂志 2003, Vol.83 (15), p.1309-1312
Hauptverfasser: 唐霓, 黄爱龙, 张秉强, 闫歌, Tong-Chuan He
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Beschreibung
Zusammenfassung:R37; 目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区的siRNA表达载体pSIHBV/C,观察其对HBV复制和表达的影响.方法将构建成功的pSIHBV/C与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV1.3共转染HepG2细胞,转染后24、48、72 h,用Abbott试剂检测细胞上清中HBsAg和HBeAg,并用免疫荧光染色法观察细胞内病毒核心抗原和表面抗原的表达.结果成功构建了针对HBV核心区的siRNA表达载体pSIHBV/C,并发现它能明显抑制HBsAg和HBeAg的分泌,转染后第2天抑制率达高峰,分别为92%、85%,而随机序列的siRNA无此作用.免疫荧光染色结果也证实转染24 h后,随pSIHBV/C比例的升高,其对HBV抗原表达的抑制作用也随之增加,当pSIRNA/C与pHBV1.3比例为1∶ 20时,pSIHBV/C对细胞内HBsAg和HBcAg表达的抑制作用最强.结论乙型肝炎病毒核心区的siRNA具有显著和特异的抗HBV复制和表达的作用.
ISSN:0376-2491
DOI:10.3760/j:issn:0376-2491.2003.15.007