朊蛋白在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901／ADR中的过表达及其意义

目的 探讨朊蛋白（PrP)在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中过表达及其与胃癌多药耐药性的相关性。方法 （1）利用Northern印迹和Western印迹分别从RNA水平和蛋白质水平检测朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR及其亲本细胞SGC7901中的表达；（2）借助DNA重组技术构建朊蛋白基因的正反义真核表达载体；（3）通过电穿孔方法将正反义真核表达载体分别转入SGC7901和SGC7901/ADR细胞；（4）以流式细胞仪检测瞬时转染细胞中的阿霉素蓄积和潴留。结果 （1）Northern印迹和Western印迹结果提示朊蛋白在SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达显著高于其在SGC7901中的表达；（2）将正反义真核表达载体转入SGC7901（命名为PS）和SGC7901/ADR（命名为PA）中，PCDNA3.1空载体转入SGC7901（命名为BS）和SGC7901/ADR（命名为BA）；转染48h后检测转染细胞的平均阿霉素荧光强度，阿霉素蓄积BS为8.9±0.7,PS为6.6±0.3,BA为5.5±0.7,PA7.5±0.6。阿霉素潴留BS为8.0±0.7,PS为5.9±0.5,BA5.1±0.7,PA为7.1±0.5,PS与BS相比两组均为P