骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞自噬水平的研究

目的 研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)自噬水平的变化,探讨细胞自噬在MDS中的作用.方法 以38例MDS患者为实验组,以26例巨幼细胞贫血患者为对照组,抽取骨髓并分离BMMNC.应用透射电镜观察自噬情况;采用单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色法检测自噬泡水平;采用RT-PCR、免疫荧光技术及蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin1 mRNA及蛋白的表达水平.结果 MDS患者BMMNC内易见自噬泡;MDC染色显示MDS患者BMMNC含自噬泡细胞数量显著高于对照组[(9.75士2.63)％对(2.90±0.89)％,P＜0.05];MDS患者BMMNC LC3阳性细胞比例显著高于对照组[(6.13±1.03)％对(1.50士0.58)％,P＜0.05].低危/中危-1MDS患者BMMNC Beclin1及LC3A mRNA表达水平显著高于对照组(3.61±3.02对1.55士1.03,P＜0.05;6.56士3.97对1.21士0.95,P＜0.05);低危/中危-1 MDS患者BMMNC自噬负性调控基因-哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)mRNA水平显著低于对照组(0.39±0.37对1.50± 1.03,P＜0.05);中危-2/高危MDS患者BMMNC Beclin1、LC3和mTOR mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P值均＞0.05).蛋白免疫印迹法显示低危/中危-1患者BMMNC Beclin1蛋白表达(1.257士0.197)高于对照组(0.528士0.086)及中危-2/高危(0.622±0.118),差异均有统计学意义(P＜0.05).中危-2/高危组和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 低危/中危-1 MDS患者BMMNC自噬水平升高,中危-2/高危MDS组患者BMMNC自噬水平无明显改变,自噬对MDS患者可能起保护性作用,自噬水平相对不足可能与MDS的进展有关.