扩增脐血来源NK细胞增强其抗血液肿瘤细胞作用的研究

目的探讨利用转染膜型IL-15和4-1BB配体K562（K562-mbl5-41BBL）细胞作为滋养细胞体外扩增脐血来源自然杀伤（CB．NK）细胞，对血液肿瘤细胞杀伤能力的作用研究。方法用K562-mbl5—41BBL细胞作为滋养细胞体外增强培养CB—NK细胞，培养21d后用流式细胞仪检测扩增的CB—NK细胞表面受体的表达，用51Cr释放试验检测扩增的CB—NK细胞对血液肿瘤细胞的杀伤作用以及其免疫球蛋白样受体的配体特异性。结果培养前、后的CB—NK细胞表面抑制型受体CDl58a[（14．37±11．12）％对[16．77±11．65）％]、CDl58b[（40．92±19．02）％对（42．48±18．11）％]、NKG2A[（70．20±18．43）％对（78．90±13．69）％]的表达水平差异均无统计学意义（P值均〉O．05），活化型受体NI[p30[（4．14±2．05）％对（54．10±13．27）％]、NKp44[（0．52±1．16）％对（72．10±17．30）％]、NKp46[（44．19±6．19）％对（80．63±-14．01）％]和NKG2D[（72．25±14．35）％对（97．50±2．55）％]表达明增高，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。扩增的CB—NK细胞对K562细胞[（55．3±4．2）％对（74．3±3．6）％]、Raji细胞[（12．0±3．6）％对（60．64-5．O）％]的杀伤作用明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。CDl58a—CDl58b—CB．NK细胞对表达不同HLAI类分子配体的靶细胞均有较高的杀伤性，CDl58a＋CDl58bCB—NK细胞对221-Cw4以及221-Cw3Cw4的杀伤性相对低，而CDl58a—CDl58b＋CB—NK细胞对221一Cw3以及221一Cw3Cw4相对低，CDl58a＋CDl58b＋CB．NK细胞仅对721—221保持较高的杀伤性。结论扩增的CB—NK细胞活化型受体的表达明显增强，而抑制型受体的表达无明显变化，其杀伤血液肿瘤细胞的能力明显增强，同时保持了NK细胞特有的免疫球蛋白受体分子的配体特异性，可为临床血液肿瘤的细胞治疗提供帮助。