丙戊酸钠协同5-氮-2＇-脱氧胞苷对U266细胞RASSF1A基因表达调控的影响

目的 探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2＇-脱氧胞苷（5-Azs-CdR）联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠（VPA）对人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞中Ras相关区域家族1基因（RASSF1）的表达调控以及对细胞生物学活性的影响.方法 5-Aza-CdR、VPA单独或联合干预U266细胞,甲基化特异性PCR（MS-PCR）法和实时荧光定量-PCR（RQ-PCR）法检测药物干预前后RASSF1A基因甲基化状态和RASSF1A mRNA的表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的改变.结果 未经药物处理的U266细胞检测到RASSF1A基因启动子区域的高甲基化,RASSF1A基因微弱表达,5-Aza-CdR可逆转RASSF1A基因CpG岛高甲基化.诱导U266细胞RASSF1A基因呈剂量依赖性表达（P〈0.05）,VPA不能诱导U266细胞RASSFlA基因表达,联合用药组U266细胞RASSF1A mRNA的表达明显增强（P〈0.05）;与5-Aza-CdR、VPA单药组相比,联合用药组对细胞增殖的抑制作用更强,细胞凋亡率明显升高（P〈0.05）;与对照组相比,5-Aza-CdR或VPA作用于U266细胞72 h后,细胞阻滞于G0/G1期,联合用药组比单独用药组G0/G1期细胞阻滞作用更明显（P〈0.05）.结论 VPA联合5-Aza-CdR能有效逆转U266细胞RASSF1A基因的异常甲基化,可显著诱导因高甲基化而沉默的RASSF1A基因再表达,并明显增强5-Aza-CdR对U266细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.