骨髓间充质干细胞对小鼠急性移植物抗宿主病的预防及治疗作用

目的观测小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）对急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防及治疗作用，并探讨其干预机制。方法建立以C57BL／6小鼠为供体、致死剂量照射的BALB／c小鼠为受体的aGVHD动物模型。将小鼠分成6组：PBS组（单纯放射组）、BM组（单纯输注骨髓）、GVHD组（输注骨髓＋脾细胞）、MSC—A组（输注骨髓＋脾细胞，并于移植当天输注1×10^5MSC）、MSC—B组（输注骨髓＋脾细胞，并于移植当天输注5×10^5MSC）、MSC—C组（输注骨髓＋脾细胞，并于＋7d输注1×10^5MSC），观测各组的生存状态；绿色荧光蛋白基因（Ad—EGFP）转染MSC，输入aGVHD模型小鼠，观察MSC在靶器官组织中的分布。结果①供体MSC可显著控制小鼠的GVHD症状，延长aGVHD小鼠的平均生存时间：PBS组为（13．5±2．6）d、GVHD组为（11．1±4．0）d，MSC—A组为（26．4±7．7）d、MSC—B组为（22．7±9．2）d，MSC—C组为（22．9±8．2）d，MSC各组与GVHD组比较差异均有统计学意义（P〈0．01），但MSC各组之间无明显差异（P=0．28）。病理评估显示MSC可明显减少小肠及脾脏组织中淋巴细胞的浸润，减轻损害。②MSC可明显减少aGVHD环境中Thl类炎性因子的分泌：GVHD、MSC—A、MSC—B、MSC—C各组＋14d外周血上清中IFN-γ的水平分别为（607．9±157．1）、（143．6±37．5）、（117．0±77．8）、（131．4±63．4）ng／L，各组TNF—α的水平分别为（52．31±17．95）、（6．02±3．99）、（5．21±0．28）、（22．39±18．21）ng／L；MSC不影响aGVHD环境中异基因T淋巴细胞的增殖，但促进其凋亡：GVHD、MSC—A、MSC—B、MSC—C各组的CD3^＋AnnexinV^＋PI^-细胞率分别为（10．3±6．6）％、（13．5±13．8）％、（19．7±6．0）％、（16．6±7．3）％，其中MSC—B组与GVHD组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。③Ad—EGFP成功高效转染MSC，输注入aGVHD模型鼠6d后，共聚焦显微镜下发现MSC可大量分布至肺及小肠，而肝、脾及肾脏有少量分布。结论MSC可促进异基因T淋巴细胞凋亡、抑制其二次活化功能、减少Th1类炎症因子的分泌表达、参与修复aGVHD靶