135例骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因突变的定量研究

目的研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量分析，初步探讨其临床意义。方法采用突变序列扩增系统PCR（ARMS—PCR）法检测JAK2突变的发生率及其突变类型；采用毛细管电泳法定量分析JAK2突变转录本水平。结果135例MPN患者共检出95例JAK2V617F阳性，总阳性率为70．4％；真性红细胞增多症（PV）患者JAK2V617F突变发生率为97．4％，原发性血小板增多症（ET）为59．6％，3例特发性骨髓纤维化（IMF）中2例阳性；95例突变患者中纯合突变36例，杂合突变59例，其中PV患者纯合突变发生率为47．3％，高于ET患者的18．1％（P〈0．05）。纯合突变者其JAK2V617F突变转录本水平高于杂合突变者（P〈0．05），杂合型PV患者的JAK2V617F突变转录本水平高于杂合型ET患者（P〈0．05）；JAK2V617F突变高表达组（转录本水平为70％～100％）的平均年龄高于低表达组（转录本水平为47．3％～70．0％），且两者年龄均较JAK2V617F阴性组为高（P〈0．05）；年龄〈60岁者其JAK2V617F转录本水平低于≥60岁者（P〈0．001）；PV患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．001），ET患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．05），且二者均较阴性组为高（P〈0．05），血红蛋白水平在高表达组与低表达组间差异无统计学意义（P〉0．05），但二者均较阴性组为高（P〈0．05）。101例患者进行了染色体检查，未发现核型异常与JAK2V617F突变之间存在相关性。结论ARMS—PCR可作为检测JAK2V617F突变较灵敏的方法，结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床MPN的诊断和微量残留病的检测。