肿瘤坏死因子诱导U937细胞凋亡过程中IκB-α蛋白表达的研究

R3; 目的了解肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导U937细胞凋亡过程中IκB-α蛋白的表达、降解及亚细胞定位,并探讨其降解机制.方法用荧光显微镜观察TNF-α诱导细胞凋亡过程中U937细胞内IκB-α蛋白的表达及亚细胞定位,用流式细胞术分析IκB-α蛋白的变化及降解情况,并行蛋白酶抑制剂--对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基甲酮(TPCK)阻断实验,探讨细胞内IκB-α蛋白变化的可能机制;用流式细胞术分析U937细胞凋亡.结果①IκB-α分子多呈环状分布于整个胞浆,胞核内则无.②TNF-α刺激后,胞浆中仅见少许IκB-α分子,胞核内无;流式细胞术证实TNF-α刺激后一定时间内IκB-α蛋白表达水平逐渐降低.③TPCK阻断后,IκB-α分子仍呈环状分布于整个胞浆,胞核内则无.流式细胞术证实在对应时间内其表达明显高于TNF-α组.④TNF-α诱导的U937细胞凋亡率为(60.73±1.61)%.结论①在TNF-α诱导的U937细胞凋亡过程中,存在IκB-α蛋白降解,提示核因子-κB的激活.②IκB-α蛋白降解需TPCK敏感的蛋白酶参与.③TPCK敏感的蛋白酶也参与了TNF-α诱导U937细胞凋亡.