我国3例范可尼贫血患者原始B-淋巴细胞系的建立和分型

R552; 目的通过建立我国范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)患者原始B-淋巴细胞系进行FA分型。方法将我国3例FA患者外周血细胞用EB病毒活化法建立原始B-淋巴细胞系，采用丝裂霉素(MMC)生长抑制试验和细胞融合后MMC抑制试验的互补试验进行分型；利用单克隆抗体免疫沉淀法和Western blot法进行分型。结果成功建立了3个FA原始B-淋巴细胞系，其中2个细胞系仍然保持对MMC的敏感性，IC50均小于10nmol/L；用1例嵌合体患者细胞所建立的原始B-淋巴细胞系对MMC不敏感，IC50大于10mol/L；经MMC抑制试验的互补试验和Western blot检测，3例FA患者均为FA-A亚型。结论FA两种分型方法各有利弊，细胞融合后MMC生长抑制试验分型可靠，适用于所有未知FA亚型的患者，但该法依赖于建立MMC敏感的原始B-淋巴细胞系，无法用于FA-A嵌合体患者，方法耗时、耗力，出结果慢；而利用单克隆抗体免疫沉淀法和Westem blot法分型不依赖于建立MMC敏感的原始B-淋巴细胞系，可用于FA嵌合体患者，但仅适用于基因已知和已有特异性抗体的亚型，方法简单，出结果快。