Survivin启动子调控腺病毒介导富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因治疗膀胱癌的实验研究

目的探讨Survivin启动子驱动的重组腺病毒Ad—Surp—LRIG1对膀胱癌的治疗作用及机制。方法用Ad—Surp—LRIG1和Ad—LRIG1分别感染人膀胱癌细胞BIU87及人膀胱上皮永生化细胞SV—HUC-1，根据报告基因表皮生长因子受体（EGFR）表达的不同计算病毒的细胞转染率。MTF法评估Ad—Surp—LRIG1和Ad—LRIG1对BIU87细胞生长的抑制作用。建立膀胱癌裸鼠移植瘤模型，将成瘤裸鼠随机分为3组，Ad—Surp—LRIGI组（尾静脉注射Ad—Surp—LRIG1上清液）、AD-LRIG1组（尾静脉注射Ad—LRIG1上清液）、PBS组（尾静脉注射PBS），观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线；RT—PCR检测各组肿瘤组织中LRIG1和EGFRmRNA的表达。结果当感染复数（MOI）=25时，Ad—Surp—LRIG1在BIU87细胞中的转染效率为74．56％，在SV—HUC-1细胞中转染率为0，差异有统计学意义（f=58．640，P=0．ooo）；Ad—LRIGl在BIU87细胞中的转染效率为68．27％，在SV-HUC-1细胞中转染率为72．52％，差异无统计学意义（x2=0．075，P=0．784）。Ad—Surp—LRIG1和Ad—LRIG1在BIU87细胞中的转染效率相比，差异无统计学意义（X2=0．016，P=0．898）。与PBS液对照组比较，Ad-Surp—LRIG1和Ad-LRIG1均能明显抑制BIU87细胞的生长，转染4d后这一差异有统计学意义（F=15．960，P=0．000），而Ad—Surp—LRIG1组和Ad—LRIG1组细胞生长速度无明显差异。Ad—Surp-LRIG1组肿瘤生长速度明显慢于其他2组，治疗结束后Ad—Surp—LRIG1组肿瘤质量小于其他2组，差异有统计学意义（F=97．860，P=0．000），Ad—LRIG1组与PBS组相比差异无统计学意义（t=1．73，P=0．06）。与其他2组比较，Ad—Surp—LRIG1组LRIG1mRNA表达水平明显升高（F=851．343，P=0．000），而EGFRmRNA表达水平则显著降低（F=591．205，P=0．000）。结论Ad—Surp-LRIG1能选择性转染人膀胱癌细胞BIU87，在体内外均能明显抑制膀胱癌的生长，其机制可能部分与LRIG1能下调EGFR的表达有关。