骨髓基质干细胞治疗脊髓损伤的体外诱导分化及相关蛋白表达

目的探讨模拟脊髓细胞环境下骨髓基质干细胞（BMSCs）的分化及蛋白差异表达。方法分离培养Wistar大鼠骨髓的BMSCs和脊髓的神经细胞，设立BMSCs自然分化组、与神经细胞共培养组和双层培养组，8d后对各组BMSCs进行神经特异性烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光检测。应用表面增强激光解析离子化．飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）筛选双层培养组BMSCs变化明显的蛋白进行分析。结果BMSCs与神经细胞共培养和双层培养8d后，BMSCs呈神经细胞形态。NSE和GFAP检测结果，BMSCs与神经细胞共培养组明显高于BMSCs与神经细胞双层培养组（P〈0．05），而BMSCs和神经细胞双层培养组又明显高于BMSCs自然分化组（P〈0．05）。SELDI-TOF-MS检测到TIP39_RAT和CALC_RAT增加到原来的5．360和2．807倍，INSL6_RAT、PNOC_RAT和PCSK1_RAT减少到原来的38．0％、49．9％和43．8％。结论在脊髓神经细胞微环境下体外培养BMSCs能诱导其分化成神经细胞，而且接触培养分化率高；BMSCs在向神经细胞分化机制中与TIP39_RAT、CALC_RAT、INSL6_RAT、PNOC_RAT和PCSKI_RAT密切相关。