Sirt3在晚期糖基化终产物诱导的心肌老化中的作用及机制

R541; 目的 研究沉默信息调节因子 3(Sirt3)在晚期糖基化终产物(AGEs)诱导心肌老化过程中的作用,并初步探讨黄山药总皂苷(TSDP)改善心肌老化的机制.方法 提取原代心肌细胞,AGEs干预诱导细胞老化,转染小干扰RNA(siRNA)敲降Sirt3 表达.免疫印迹实验检测P16、P53、超氧化物歧化酶-2(SOD2)及SIRT3 的蛋白表达水平.半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒检测细胞老化.2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS).TSDP预干预AGEs诱导的心肌老化后,采用SA-β-Gal染色试剂盒检测细胞老化.采用GraphPad Prism统计软件进行数据分析.组间比较采用单因素方差分析.结果 和未转染慢病毒的对照组相比,转染阴性参照NC siRNA后加入AGEs的干预组SIRT3 及SOD2 的表达减少,P53 的表达增加,SA-β-Gal染色阳性细胞比例及活性氧的水平增加.转染Sirt3 siRNA后加入AGEs的干预组与对照组相比,SIRT3 及SOD2 表达减少,SA-β-Gal染色阳性细胞比例及活性氧水平升高,且与转染Sirt3 siRNA组相比,P53 表达水平进一步增加.转染NC siRNA的TSDP预处理AGEs干预组较转染NC siRNA后AGEs干预组SA-β-Gal染色阳性细胞比例减少,但转染Sirt3 siRNA的TSDP预处理AGEs干预细胞后上述TSDP引起的SA-β-Gal改变作用消失.结论 AGEs可能是通过下调Sirt3 的表达水平,减少抗氧化物蛋白SOD2 的表达,加重线粒体氧化应激,促进AGEs诱导的心肌老化进程.TSDP可能通过调控 Sirt3 的表达水平而影响老化.