重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞的氧化性损伤研究

目的探讨重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）造成的氧化性损伤。方法（1）HUVEC进行如下分组处理：20％健康孕妇血清刺激（正常血清组）、20％重度子痫前期患者血清刺激（PE组）、20％重度子痫前期患者血清＋3×10^3U／ml过氧化氢酶共同刺激（PE＋Cat组），并设置空白对照组，继续培养后，透射电镜观察细胞损伤情况，并用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白AP02．7的表达情况。（2）激光共聚焦显微镜下，对HUVEC进行实时扫描的同时给予如下分组处理：正常血清组、PE组、PE＋Cat组、加入100μmo]／LH2O2（阳性对照组），分别检测胞内活性氧簇（ROS）、Ca^2＋及线粒体膜电位水平。结果（1）透射电镜下，PE组HUVEC的损伤明显，出现细胞膜脱落，并包裹细胞质形成自噬体，线粒体水肿，核固缩；但PE＋Cat组的HUVEC虽然线粒体有轻度水肿表现，但嵴清晰可见，细胞核形态基本正常，细胞损伤明显改善。PE组的HUVEC中AP02．7的表达率为（37．8±1．1）％，与空白对照组[（13．4±1．1）％]、正常血清组[（13．5±1．5）％]比较显著升高，差异均有统计学意义（P〈0．01）；而PE＋Cat组AP02．7表达率为（19．2±1．6）％，显著降低，与PE组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）激光共聚焦显微镜下PE组的HUVEC胞内ROS、Ca^2＋荧光强度变化幅度分别为12．0±1．3、4．1±0．7，而正常血清组分别为1．1±0．4、0．6±0．4，PE＋Cat组分别为1．5±0．5、0．9±0．5，PE组分别与正常血清组、PE＋Cat组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。PE组的HUVEC线粒体膜电位荧光强度在扫描120S时有显著降低，而正常血清组、PE＋Cat组变化不明显。结论重度子痫前期患者血清通过促进ROS生成，增强Ca^2＋超载水平和降低线粒体膜电位对血管内皮细胞造成氧化性损伤。