稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌细胞生物学特性的影响

目的观察稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA（siRNA）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞生物学特性的影响。方法实验分为3组，反义序列载体（卵巢癌细胞系OVCAR细胞转染载有HMGA1基因siRNA序列的pSilence4．1-CMV—Hs质粒）、无关序列载体（OVCAR细胞转染载有HGMA1基因无关序列的pSilence4．1-CMV—Hn质粒）和空白对照组（OVCAR细胞仅转染脂质体），3组均经抗性筛选获得稳定转染的细胞系。采用RT—PCR技术、蛋白印迹法检测3组细胞中HMGA1mRNA和蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞增殖情况，绘制细胞生长曲线；体外侵袭实验观察3组细胞转染前后侵袭能力的变化；裸鼠接种3组细胞后观察其成瘤能力的变化。结果（1）反义序列载体组转染前、后OVCAR细胞中HMGAImRNA表达水平分别为（86．3±2．7）％和（35．8±3，1）％，HMGA1蛋白表达水平分别为（68．6±2．8）％和（22．3±4．2）％，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；无关序列载体组和空白对照组转染前、后HMGA1mRNA和蛋白表达水平分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）反义序列载体组OVCAR细胞增殖速度明显慢于无关序列载体组和空白对照组（P〈0．05）。（3）转染前、后的穿膜细胞数，反义序列载体组分别为（53±6）和（21±6）个，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；无关序列载体组和空白对照组转染前、后的穿膜细胞数分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（4）接种转染后的OVCAR细胞后，反义序列载体组裸鼠的成瘤时间为（6．0±0．9）d，明显短于无关序列载体组的（12．3±3．9）d和空白对照组的（13．0±2．3）d（P〈0．05）。接种5周后，反义序列载体组裸鼠的肿瘤重量和体积分别为（0．8±0．3）g和（205±34）mm^3，分别与无关序列载体组[分别为（2．1±0．4）g和（987±82）mm^3]和空白对照组[分别为（2．3±0．3）g和（956±79）mm^3]比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HMGA1siRNA可显著降低卵巢癌细胞中HMGA1基因的表达，并对卵巢癌细胞的生长有抑制作用。