乙型肝炎免疫球蛋白阻断胎盘滋养细胞感染乙型肝炎病毒的实验研究

目的探讨在体外条件下，乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）能否阻断乙型肝炎病毒（HBV）对胎盘滋养细胞的感染。方法将胎盘滋养细胞传至6孔板中，用含10％新生牛血清的DMEM培养基在37℃、5％CO2孵箱中培养。细胞传人24h后进行HBV感染阻断实验。实验分为A组：2％DMEM3ml＋HBV阳性血清0．5ml；B组：2％DMEM3ml＋HBV阳性血清0．5ml（HBV阳性血清加入前，先与80U的HBIG在37℃条件下孵育30min）。C组：2％DMEM 3ml＋HBV阳性血清0．5ml（HBV阳性血清加入前，先与40U的HBIG在37℃条件下孵育30min）；D组：2％DMEM 3ml与40U的HBIG在37℃条件下孵育30min后＋HBV阳性血清0．5ml；E组：2％DMEM3ml＋40U的HBIG；F组：2％DMEM3ml＋HBV阴性血清0．5ml。24h后，移去各孔中的培养液后，用0．01mol／L的磷酸盐缓冲液（PBS）彻底清洗各细胞培养孔，2％DMEM 4ml继续培养，每隔12h（12～84h）收集各细胞培养孔中的培养上清液，应用酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中的HBsAg水平[以吸光度（A）值表示]，PCR检测细胞培养上清液中HBV DNA。结果PBS清洗前A、B、C、D、E、F组细胞培养上清液中的HBsAg水平分别为2．697、0．040、0．102、0．198、0．036、0．040；A、B、C、D组细胞培养上清液中HBV DNA为阳性，E、F组HBV DNA为阴性。A、B、C、D、E、F组培养12—84h上清液中HBsAg水平均值分别为1．550±0．270、0．032±0．016、0．100±0．087、0．052±0．044、0．034±0．020、0．034±0．022；A组HBsAg水平与B、C、D、E、F组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。84h的细胞培养上清液，A组HBV DNA阳性；B、C、D、E、F组HBV DNA阴性。结论体外实验研究表明，HBIG可以有效阻断HBV对胎盘滋养细胞的感染。