脐血CD3AK细胞培养上清液对白血病细胞株HL-60细胞的影响

R72%R73; 目的在体外实验中,研究脐血CD3AK细胞培养上清液(cord blood CD3AK supernatant, CS)对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响.方法以不同浓度的CS(10% CS、15% CS、20% CS)作用于不同时间(3 d,6 d和9 d)的HL-60细胞为实验对象,应用细胞计数法结合锥虫蓝拒染法研究CS诱导的HL-60增殖情况.应用流式细胞仪分析CS作用前后细胞周期及细胞表面分化标志CD11b的变化,光学显微镜下观察细胞形态变化,氯化硝基唑蓝(NBT)还原实验研究细胞的NBT还原阳性百分率,从而研究HL-60细胞的分化.应用电子显微镜观察细胞凋亡,原位末端标记法研究CS作用前后HL-60细胞的凋亡变化.结果随CS作用时间的延长和剂量的增加,细胞增殖速度逐渐减慢.细胞周期分析显示,CS作用后G0期和G1期显著增多,S期显著减少,G2期和M期无明显变化,说明CS使细胞阻滞在G0和G1期.随CS作用时间的延长,细胞体积逐渐增大,3 d后被诱导的细胞表面开始表达分化标志物CD11b并出现细胞核型变化,NBT阳性细胞增多,随CS浓度的增加和作用时间的延长,这些变化越明显.20% CS诱导72 h后,被诱导的细胞出现凋亡,随诱导时间延长,凋亡细胞增多.结论 CS能抑制HL-60细胞的增殖,诱导HL-60细胞分化和凋亡.