15-氟尿嘧啶诱导人肝癌细胞凋亡的机理研究

R73; 目的观察肝癌细胞Bel7402中内源性NO在5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导其凋亡中的作用，为进一步揭示5-氟尿嘧啶的作用机理，同时寻找提高5-氟尿嘧啶的临床疗效的辅剂。方法 人肝癌细胞Bel 7402按常规条件培养于无L-精氨酸(L-Arg)的DMEM培养液中。在5-氟尿嘧啶作用下, 采用免疫组化法观察诱导诱生型一氧化氮合酶的表达情况，并在其底物L-精氨酸存在的前提下，采用酶法测定硝酸盐/亚硝酸盐，反映NO的生成，并证明其的作用。用电镜观察凋亡细胞的形态，流式细胞仪进行凋亡细胞的定量。用L-精氨酸的竞争性拮抗剂L-NAME(Nω-nitro-L-Arginine methyl ester)对研究结果进行验证。应用高清晰度病理彩色图文分析系统对免疫组化结果进行光密度定量分析。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果 在5-氟尿嘧啶的作用下，诱生型一氧化氮合酶表达增强(5-氟尿嘧啶组0.1687±0.01968，对照组0.1049±0.01266， P