烧伤血清诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α的规律

R644.03%R349.21; 目的:探讨烧伤血清诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌TNF-a的规律及其在脓毒症中的作用.方法:烧伤血清的剂量效应组分别用含有0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml烧伤血清的培养基与小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7共培养6h,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量,采用流式细胞技术观察细胞的凋亡.烧伤血清的时间效应组以含有2.5ml烧伤血清的培养基,对照组以不含烧伤血清的培养基,另外以含有2.5ml烧伤血清和100mg/L LPS的混合组的培养基分别培养RAW264.7细胞0,2,4,6,8,10,12,24 h,同上留取离心后的培养液上清,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF-a含量.结果:将烧伤血清加入到小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养液中能明显刺激TNF-a的分泌.在0.5 ml～2.5 ml范围内,烧伤血清诱导RAW264.7细胞的TNF-a分泌增加,呈显著的剂量依赖性关系,2.5ml烧伤血清能明显诱导RAW264.7细胞的凋亡;烧伤血清组和烧伤血清与LPS的混合组RAW264.7细胞的TNF-a分泌在0～24 h间呈双相性规律.结论:烧伤血清能诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的TNF-a分泌与凋亡,初步证实烧伤血清在脓毒症的发生、发展中发挥重要作用.