枢经推拿对神经病理性疼痛大鼠TLR8/ERK信号通路及LncRNA-GAS5的影响及作用机制研究

R441.1; 背景 近年来,枢经推拿在治疗神经病理性疼痛方面展现出较好的疗效,但其具体作用机制尚未充分阐明.目的 以L5 脊神经结扎而成的神经病理性疼痛大鼠模型为观察对象,根据各项研究指标观察枢经推拿对大鼠的镇痛作用,探讨其是否通过影响长链非编码RNA-生长阻滞特异性转录因子 5(LncRNA-GAS5)进而调控脊髓背角神经元凋亡达到镇痛效果.方法 实验于 2021 年 1-6 月在广西中医药大学、广西大学动物医学实验中心完成.选取健康雌性SD大鼠 120 只,按随机数字表法分为正常组、模型组、假手术组、假推拿组和枢经推拿组,每组 24 只;模型组、假手术组、假推拿组和枢经推拿组通过结扎L5 脊神经来制备神经病理性疼痛大鼠模型.造模 24 h后,假手术组暴露L5 脊神经几分钟,不予结扎,逐层缝合关闭伤口;假推拿组轻抚大鼠双后肢 18 min;枢经推拿组用自备按摩仪循序刺激两侧足少阳胆经上的环跳、阳陵泉、悬钟三穴,刺激力量为 5 N,频率 2 Hz,每穴、每法干预 1 min,双侧 6 个穴位,3 种手法,共计 18 min;正常组、模型组正常喂养及观察,不施加任何干预.于造模前及造模后 1、3、7、14 d分别进行行为学检测(机械缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期);分别于干预 7、14 d,随机抽取 12 只进行取材检测脊髓组织中介导TLR8/ERK信号通路相关蛋白表达情况〔脊髓组织B淋巴细胞瘤 2(Bcl-2)、Caspase-3、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、Toll样受体8(TLR8)蛋白表达水平,LncRNA-GAS5、miR-21基因表达水平)〕.结果 (1)行为学方面,模型组、假推拿组、枢经推拿组大鼠造模后 1、3、7、14 d机械缩足反射阈值均低于正常组(P＜0.05);假手术组、假推拿组、枢经推拿组的机械缩足反射阈值在造模后 14 d均高于模型组(P＜0.05);假手术组、枢经推拿组造模后 7、14 d机械缩足反射阈值高于假推拿组(P＜0.05).假手术组、枢经推拿组在造模后 1、3、7 d热缩足反射潜伏期均低于正常组(P＜0.05);假手术组、假推拿组、枢经推拿组在造模后 7、14 d热缩足反射潜伏期均长于模型组(P＜0.05);假手术组、枢经推拿组在造模后 14 d热缩足反射潜伏期长于假推拿组(P＜0.05).(2)信号通路相关蛋白以及基因表达水平方面,造模后 7 d,正常组Bcl-2 蛋白表