H3N2亚型犬流感病毒实验感染模型的建立

[目的]建立H3N2亚型犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)实验感染模型,了解犬流感的发病特征,为疫苗效力评价奠定基础.[方法]6-13月龄CIV血凝抑制(haemagglutination inhibition,HI)抗体阴性(HI＜1∶10)比格犬26只,其中3只鼻腔喷雾PBS作为阴性对照,另23只分5组(10、103、105、106、107EID50/只),分别为3、5、5、5、5 只/组,每只犬各鼻腔喷雾 H3N2 亚型 CIV(A/canine/China/Huabei-170607/2017(H3N2),简称 HB 株)病毒液 1mL.观察临床症状、肺脏病变和肺脏组织病理学变化,计算肺实变率,检测病毒和HI抗体效价.[结果]10 EID50剂量感染组,3只犬均未出现明显临床症状,肺脏均无明显眼观病变,肺脏实变率0％,无组织病理学变化,病毒检测均为阴性,HI抗体效价几何平均值(geometric mean titer,GMT)为1∶15.9;103EID50剂量感染组,5只犬中有4只喘息、流鼻汁和咳嗽,1只犬未表现出临床症状,2只犬肺脏出现轻微实变,实变率平均为1.4％,4只犬病毒分离阳性,HI抗体效价GMT为1∶320;105EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后5 d开始出现流鼻汁和咳嗽等临床症状,肺脏均有实变,实变率平均为4.2％,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1∶2 940.7;106EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后4 d体温升高、流鼻汁、咳嗽,临床症状出现较105EID50剂量感染组早1 d,肺脏实变程度增加,实变率平均为17.9％,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1∶2 228.7;107EID50剂量感染组,5只犬在攻毒后3 d表现出体温升高、流鼻汁、咳嗽等严重的临床症状,症状出现较106EID50剂量感染组早1 d,肺脏严重实变,实变率平均为29.0％,肺泡间隔增宽,病毒分离均为阳性,HI抗体效价GMT为1∶2 940.7;对照犬均未出现明显临床症状,肺脏均无明显眼观病变,无组织病理学变化,病毒检测均为阴性,HI抗体效价均＜1∶10.[结论]106EID50剂量病毒是能引起犬明显发病的最小病毒接种剂量,建立起H3N2亚型CIV实验感染模型.