胆囊收缩素A型受体基因序列变异和表达与略阳乌鸡饲料转化率的关联性研究

[背景]食欲和饲料转化率的提高构成了现代肉鸡快速生长的生理基础.胆囊收缩素A型受体(CCKAR)是介导胆囊收缩素(CCK)饱食信号和消化调节作用的关键受体.鉴于CCK信号在能量平衡调节中的重要作用,CCKAR的表达水平与鸡的生长性能密切相关.然而,CCKAR水平调节鸡生长的确切机制尚不清楚.[目的]通过研究阐明CCKAR基因表达水平和序列变异与鸡饲料转化率的关系,为鸡生长性状遗传调控研究和饲料转化率选育奠定基础.[方法]测定略阳乌鸡12—16周龄料肉比(公鸡n=62,母鸡n=67)和26—30周龄料蛋比(n=150).用PCR-RFLP法检测CCKAR基因内两个同义突变(g.73206714T>C和g.73209189C>T)的基因型.以性别为固定效应,用双因素方差分析检验g.73206714T>C和g.73209189C>T与料肉比的关联性,用单因素方差分析检验2个SNP与料蛋比的关联性.用JASPAR数据库预测g.73206714T>C对转录因子结合位点产生的影响.以g.73206714T>C为标记,选取10只杂合子(CT)公鸡,用PCR-RFLP法检测CCKAR基因在g.73206714T>C位点等位基因间的表达差异.选取30只带有采食量和料肉比记录的公鸡,用qPCR检测CCKAR基因在下丘脑、脑垂体、胰腺、胆囊和十二指肠中的表达水平,分析CCKAR表达水平与采食量和料肉比的相关性.[结果]性别效应对略阳乌鸡料肉比有显著影响(F=29.44,PC与料肉比显著关联(F=8.44,P=0.0004),其中,TT型的料肉比(5.18±0.63)显著低于CC(6.37±1.1)和CT型(6.17±0.95).CC型和CT型的料肉比无显著差异.g.73206714T>C与性别的互作效应对料肉比的影响不显著.G.73206714T>C对28个转录因子结合位点有潜在影响.等位基因特异性表达试验显示,T等位基因的转录本丰度显著高于C等位基因,表明CCKAR在等位基因间的表达差异很可能是构成g.73206714T>C与料肉比关联性的遗传基础.略阳乌鸡26—30周龄的平均料蛋比为2.85±0.41.g.73206714T>C和g.73209189C>T的基因型效应对料蛋比的影响均不显著.在5个组