抗寒无核葡萄杂种胚挽救及分子标记辅助选择

[目的]利用胚挽救技术创制抗寒无核葡萄新种质,为选育抗寒无核葡萄新品种奠定基础.[方法]分别以抗寒欧美杂交无核葡萄品种'Jupiter'和欧山杂种有核优系'00-1-5'('玫瑰香'×'山葡萄黑龙江实生')为父本,5个欧亚种无核品种'Ruby Seedless''秦红1号''秦红2号''Crimson Seedless,和'秦秀'为母本杂交,在各母本最佳胚珠取样时期取样,以固-液双相培养基MM3和ER分别作为胚发育培养基进行胚珠培养,比较不同母本和2种培养基对胚发育率、萌发率、成苗率及畸形苗率的影响;以WPM+0.2 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 IAA固体培养基作为胚萌发培养基,获得胚挽救后代,经炼苗后移栽至田间;分别在2MS+0.2 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IAA培养基中添加0、1.0和1.6 mg·L-1 ZnSO4进行畸形苗转化正常苗培养,以筛选最适宜转化培养基;利用无核基因分子标记SCF27-2000对胚挽救后代进行无核性状分子检测.[结果]5个杂交组合的胚珠接种至MM3培养基的数量为2 158个,获得发育胚175个和胚挽救苗118株;接种至ER培养基的胚珠数为894个,获得发育胚74个和胚挽救苗58株.以'00-1-5'为父本的2个杂交组合中,'秦红2号'比'秦秀'更适合作为母本,其杂种胚的发育率和成苗率最高,分别为17.04％和7.41％;以'Jupiter'为父本的3个杂交组合中,'Ruby Seedless'×'Jupiter'效果最好,胚发育率和成苗率分别为13.71％和10.67％,其次是'秦红1号'x'Jupiter',胚发育率和成苗率分别为14.39％和4.71％,而'Crimson Seedless'×'Jupiter'胚发育率和成苗率最低,分别为9.55％和1.76％.接种至MM3培养基的胚珠,获得的胚发育率和成苗率均高于ER培养基.畸形苗率最高的是'秦红1号'x'Jupiter',而'Ruby Seedless'×'Jupiter'未出现畸形苗,ER培养基比MM3培养基形成的畸形苗率高.'秦红2号'×'00-1-5'组合畸形苗接种至2MS+1.6 mg·L-1 ZnSO4+0.2 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IAA转化培养基效果最好,转化率为40.00％.利用无核标记SCF27-2000对5个杂交组合176株杂种后代检测表明,1