恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定

恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定

S8; 碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48:1.用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株特异性分泌细胞2C5和5D5并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1:3200和1:6400.2C5和5D5均属IgG28型抗体.单抗5D5间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1:1000,ENFX的抑制曲线在0.13～10000 ng·ml-1之间线性关系良好(r=-0.9782),检测限(LOD)为...

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Veröffentlicht in:中国农业科学 2004, Vol.37 (7), p.1060-1064
Hauptverfasser: 蔡勤仁, 曾振灵, 杨桂香, 陈杖榴, 方炳虎
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:S8; 碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48:1.用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株特异性分泌细胞2C5和5D5并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1:3200和1:6400.2C5和5D5均属IgG28型抗体.单抗5D5间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1:1000,ENFX的抑制曲线在0.13～10000 ng·ml-1之间线性关系良好(r=-0.9782),检测限(LOD)为0.13 ng·ml-1,ENFX的IC50为21.67 ng·ml-1.单抗对氟喹诺酮类药物有很高的选择性,与环丙沙星、麻保沙星、沙拉沙星、达氟沙星的交叉反应率分别为110.84%、27.40%、71.05%和3 7.41%,而与头孢氨苄、氯霉素、磺胺间甲氧嘧啶等没有交叉反应.
ISSN:0578-1752
DOI:10.3321/j.issn:0578-1752.2004.07.020