双价抗虫基因共转化烟草叶绿体的研究

分别构建苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白基因[BtCryIA(C)]和水稻巯基蛋白酶基因（Oryzacystatin,OC）叶绿体转化载体，其中Bt基因叶绿体转化载体以烟草叶绿体基因trnH-psbA-trnK为同源片段，以水稻（Oryza sativa L.)叶绿体psbA基因启动子和终止子为调控基因；OC基因叶绿体表达载体以烟草叶绿体基因片段psbA-ORF512为同源片段，以烟草叶绿体16S启动子和终止子为调控基因；两载体均以壮观霉素抗性基因（aadA）为筛选基因。利用基因枪方法，共转化烟草叶片，获得壮观霉素抗生性植株。经Southern 、Western检测、表达蛋白活性测定证明，双价抗虫基因已整合到烟草叶绿体中并得到表达。转基因植株抗棉铃虫试验表明，转基因植株具有显著杀虫活性。