牛类胚胎干细胞的分离与克隆
S827.36%Q954.432; 选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM用0.25g/100ml胰蛋白酶+0.04 g/100ml EDTA),ES细胞集落用(0.125 g/100ml胰蛋白酶+0.02 g/100ml EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的ES细胞集落为细胞小块,获得了9个传至6代的牛类ES细胞系和22个传至9代的小鼠类ES细胞系.从形态特征、组织化...
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Veröffentlicht in: | 中国农业科学 2001, Vol.34 (5), p.550-555 |
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Format: | Artikel |
Sprache: | chi |
Online-Zugang: | Volltext |
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Zusammenfassung: | S827.36%Q954.432; 选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM用0.25g/100ml胰蛋白酶+0.04 g/100ml EDTA),ES细胞集落用(0.125 g/100ml胰蛋白酶+0.02 g/100ml EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的ES细胞集落为细胞小块,获得了9个传至6代的牛类ES细胞系和22个传至9代的小鼠类ES细胞系.从形态特征、组织化学染色、核型分析和ES细胞分化能力等方面对所分离与克隆的细胞进行鉴定,证明其具有ES细胞的诸多特性. |
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ISSN: | 0578-1752 |
DOI: | 10.3321/j.issn:0578-1752.2001.05.016 |