牛类胚胎干细胞的分离与克隆

S827.36%Q954.432; 选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM用0.25g/100ml胰蛋白酶+0.04 g/100ml EDTA),ES细胞集落用(0.125 g/100ml胰蛋白酶+0.02 g/100ml EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的ES细胞集落为细胞小块,获得了9个传至6代的牛类ES细胞系和22个传至9代的小鼠类ES细胞系.从形态特征、组织化...

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Veröffentlicht in:中国农业科学 2001, Vol.34 (5), p.550-555
Hauptverfasser: 安立龙, 杨奇, 冯秀亮, 杨春荣, 雷安民, 高志民, 窦忠英, 邱怀
Format: Artikel
Sprache:chi
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:S827.36%Q954.432; 选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM用0.25g/100ml胰蛋白酶+0.04 g/100ml EDTA),ES细胞集落用(0.125 g/100ml胰蛋白酶+0.02 g/100ml EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的ES细胞集落为细胞小块,获得了9个传至6代的牛类ES细胞系和22个传至9代的小鼠类ES细胞系.从形态特征、组织化学染色、核型分析和ES细胞分化能力等方面对所分离与克隆的细胞进行鉴定,证明其具有ES细胞的诸多特性.
ISSN:0578-1752
DOI:10.3321/j.issn:0578-1752.2001.05.016