荧光PCR探针熔解曲线技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性的研究

R521%R446.5; 目的:评价荧光 PCR 探针熔解曲线(fluorescent polymerase chain reaction probe melting curve,MeltPro)技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的临床应用价值.方法:收集2021年5月至2022年5月北京市疾病预防控制中心结核病门诊收治的GeneXpert MTB/RIF检测阳性的初治肺结核患者的痰标本,对每份标本同时进行涂片镜检、分枝杆菌分离培养、MeltPro技术利福平耐药性检测.分析痰标本荷菌量对MeltPro技术耐药性检测结果的影响;培养阳性菌株行利福平比例法药物敏感性试验(简称"药敏试验"),比较比例法药敏试验、GeneXpert MTB/RIF和MeltPro技术检测利福平耐药率的差异;并以培养阳性菌株利福平比例法药敏试验结果为参考标准,评价MeltPro技术耐药性检测的效能.结果:研究共收集结核分枝杆菌阳性合格痰标本158份(例),经分枝杆菌分离培养获得阳性菌株130株.MeltPro技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药的成功率为79.1％(125/158),且随着痰涂片结果等级的升高,检测成功率由"阴性"的59.3％(32/54)上升至"+++"标本的100.0％(18/18);同时,随着GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌等级的升高,检测成功率也由"极低"的64.5％(20/31)上升至"高"的92.9％(26/28),各等级间差异均有统计学意义(H=22.271,P=0.001;H=15.637,P=0.001).MeltPro技术的利福平耐药检出率为17.6％(22/125),GeneXpert MTB/RIF方法的利福平耐药检出率为12.7％(20/158),比例法药敏试验的利福平耐药检出率为13.1％(17/130),三者比较差异无统计学意义(χ2=1.537,P=0.464).以培养阳性菌株比例法药敏试验结果为参考标准,MeltPro技术和GeneXpert MTB/RIF方法检测利福平耐药的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别为100.0％(17/17)、94.6％(88/93)、77.3％(17/22)、100.0％(88/88)、0.845 和 100.0％(17/17)、97.3％(110/113)、85.0％(17/20)、100.0％(110/1