江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征

目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征，评价等位基因特异性多重PCR（multi—plex allele-specific polymerase chain reaction, MAS-PCR）检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术，对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测。结果DNA测序分析：39株耐氧氟沙星（Ofx）菌株中，32株存在gyrA基因错义突变，2株发生gyrB基因错义突变。29株耐卡那霉素（Kin）或卷曲霉素（Cm）菌株中，22株为rrsl401位点A→G突变。52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌，40株为北京基因型（76．92％，40／52），其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变（42．50％，17／40），19株北京基因型菌株发生附A1401G突变（47．50％，19／40）。北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性（X^2=1．16、1．92，P值均〉0．05）。MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61．54％（24／39），检测Km或Cm耐药株的敏感度为79．31％（23／29）。结论gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制；rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因。MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值。