利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因

从采绒革盖菌（Coriolus versicolor，常被称为杂色云芝）中筛选到产植酸酶基因．根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2，从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段．再在分离到的已知序列的5′端和3′端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1′、SP2′、SP3′，利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列．结合Blastn、ORF和Primer5．0软件，在侧翼序列上设计特异引物P3、P4，最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4．再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2，利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5．通过...

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Veröffentlicht in:	Ying yong yu huan jing sheng wu xue bao 2006, Vol.12 (5), p.618-622
1. Verfasser:	杨帆林俊芳苗灵凤郭丽琼
Format:	Artikel
Sprache:	chi
Schlagworte:	RT-PCR TAIL-PCR 云芝植酸酶
Online-Zugang:	Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:	从采绒革盖菌（Coriolus versicolor，常被称为杂色云芝）中筛选到产植酸酶基因．根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2，从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段．再在分离到的已知序列的5′端和3′端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1′、SP2′、SP3′，利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列．结合Blastn、ORF和Primer5．0软件，在侧翼序列上设计特异引物P3、P4，最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4．再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2，利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5．通过分析，分离克隆到的植酸酶基因可能是新的基因．
ISSN:	1006-687X
DOI:	10.3321/j.issn:1006-687X.2006.05.005