箭毒木种子蛋白质样品制备及双向电泳改良方法

Q945; 建立箭毒木(Antiaris toxicaria)种子总蛋白的提取方法,以及可以对其蛋白质组进行分析的双向电泳条件.通过各种条件的优化与组合,建立了以TCA-丙酮为基础的Tris-HCl提取法提取总蛋白,第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦,第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE的双向电泳体系.通过对样品制备、样品溶解、等电聚焦电泳、SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳以及染色方法等关键步骤进行分析,获得了满意的双向电泳图谱.在探索适合箭毒木种子蛋白质组学研究双向电泳方法中,比较了三氯乙酸-丙酮沉淀法、和Tris-HCl法,以及对双向电泳过程中的关键步骤的改良,认为Tris-HCl法为最适方法,...

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Veröffentlicht in:	云南植物研究 2009, Vol.31 (4), p.357-362
Hauptverfasser:	杨君, 杨云强, 杨永平, 胡向阳
Format:	Artikel
Sprache:	chi
Online-Zugang:	Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:	Q945; 建立箭毒木(Antiaris toxicaria)种子总蛋白的提取方法,以及可以对其蛋白质组进行分析的双向电泳条件.通过各种条件的优化与组合,建立了以TCA-丙酮为基础的Tris-HCl提取法提取总蛋白,第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦,第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE的双向电泳体系.通过对样品制备、样品溶解、等电聚焦电泳、SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳以及染色方法等关键步骤进行分析,获得了满意的双向电泳图谱.在探索适合箭毒木种子蛋白质组学研究双向电泳方法中,比较了三氯乙酸-丙酮沉淀法、和Tris-HCl法,以及对双向电泳过程中的关键步骤的改良,认为Tris-HCl法为最适方法,所得图谱背景清晰,蛋白质信息量最大,为箭毒木属植物的差异蛋白质组学的后续研究打下了坚实的基础.
ISSN:	0253-2700
DOI:	10.3724/SP.J.1143.2009.09043