五指山、二花脸和皮特兰猪的SLA—DRB基因外显子2 PCR-RFLP及PCR-SSCP多态性分析

采用PCR-RFLP法和PCR-SSCP法对17头五指山猪、28头二花脸猪以及28头皮特兰猪SLA-DRB外显子2进行分型。采用PCR-RFLP技术分型，结果显示：限制酶MspⅠ酶切可分出1种RFLP带，即M：143bp／102bp；限制酶RsaⅠ酶切可分出4种RFLP带，分别为A：141bp／93bp／11bp，B：111bp／69bp／54bp／11bp，C：180bp／54bp／11bp以及D：93bp／48bp／39bp／54bp／11bp。检测发现，五指山猪有2种RFLP带型：AA和BB，二花脸猪有3种RFLP带型：AA、BB和AB，皮特兰猪有3种RFLP带型：AA、CC和BD。比较五指山猪、二花脸猪与皮特兰猪，发现3个品种都是以A带为主，分别占到0．69、0．73和0．82，品种之间差别不显著。采用PCR—SSCP技术共分出7种标记带型，分别为αα、αδ、、ββ、γγ、αγ、δδ，βε，其中五指山猪有3种带型，分别为αα、αδ和ββ，二花脸猪有3种带型，分别为αα、γγ和αγ，而皮特兰则出现5种带型，分别为αα、δδ、αδ、βε和ββ。在3个品种猪中均存在α带，且其频率在各自品种中均最高，在五指山猪和皮特兰猪中δ带出现的频率次之，相应的在这两个猪种中杂合型αδ带型出现的频率则最高。Hardy-Weinberg平衡分析表明，二花脸猪SLA—DRB基因外显子2的RFLP带型达到平衡状态，其SSCP带型也达到平衡状态，五指山猪SLA—DRB基因外显子2的RFLP带型以及SSCP带型均未达平衡状态，皮特兰猪SLA—DRB基因外显子2的RFLP及SSCP带型大部分未达平衡状态。