牦牛基因组微卫星富集文库的构建与分析

牦牛基因组微卫星富集文库的构建与分析

根据生物素与链亲和素的强亲和性原理，用链亲和素磁珠亲和捕捉与生物素标记的微卫星寡核苷酸探针(CA)12、(CCG)8、(CAG)8、(TTTC)8退火结合的含有接头和牦牛微卫星序列的单链限制性酶切片段，获得单链目的片段，经PCR扩增形成双链，然后克隆到pMD18-T载体上，转化至DH5α中，首次成功构建牦牛基因组微卫星富集文库。测序结果发现，阳性克隆率为77％(37／48)，说明构建的牦牛基因组微卫星富集文库是一个高质量的文库。牦牛富集微卫星文库的建立和牦牛微卫星的筛选将为下一步进行牦牛基因组结构的分析、牦牛遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究、标记辅助选择以及经济性状的QTL定位提供大...

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Veröffentlicht in:Journal of genetics and genomics 2004, Vol.31 (5), p.489-494
1. Verfasser: 李齐发 赵兴波 罗晓林 姚平 李宁 田志华 吴常信 谢庄
Format: Artikel
Sprache:chi
Schlagworte:
富集文库
序列分析
微卫星
牦牛
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:根据生物素与链亲和素的强亲和性原理，用链亲和素磁珠亲和捕捉与生物素标记的微卫星寡核苷酸探针(CA)12、(CCG)8、(CAG)8、(TTTC)8退火结合的含有接头和牦牛微卫星序列的单链限制性酶切片段，获得单链目的片段，经PCR扩增形成双链，然后克隆到pMD18-T载体上，转化至DH5α中，首次成功构建牦牛基因组微卫星富集文库。测序结果发现，阳性克隆率为77％(37／48)，说明构建的牦牛基因组微卫星富集文库是一个高质量的文库。牦牛富集微卫星文库的建立和牦牛微卫星的筛选将为下一步进行牦牛基因组结构的分析、牦牛遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究、标记辅助选择以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。
ISSN:1673-8527