甘蔗ACC氧化酶基因片段的克隆与序列分析

1- 氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）氧化酶是植物乙烯合成的一个关键酶，乙烯作为一种内源激素，对植物生长、老熟过程有多方面的调节作用。根据报道的各种植物ACC氧化酶氨基酸序列上前后两个保守区设计两个简并引物，以甘蔗总DNA为模板，通过PCR扩增到一个940bp的基因片段。将片段序列在MCBI的BLAST软件上进行同源性搜寻，显示的63个序列全部是ACC氧化酶基因，因而认为克隆到的片段就是甘蔗ACC氧化酶基因的一个成员。经对不同植物来源的ACC氧化酶基因家族进行比较分析，去除一个103bp的"内含子"后，推导的氨基酸序列为279个残基，占推测全长氨基酸残基总数的86％左右。经同源性分析，序列与毛竹和水稻ACC氧化酶的同源率达到86％。系统进化分析表明，该序列最先与水稻、其次和香蕉的ACC氧化酶聚类，然后再与双子叶植物的ACC氧化酶聚类，符合按形态特征分类的血缘关系。基因的获得对下一步了解乙烯的合成表达与甘蔗生长、成熟过程之间的关系奠定了基础。