成人骨髓间充质干细胞体外培养、鉴定与成骨诱导

R394.2; 背景：骨髓间充质干细胞具有自我增殖和多向分化潜能，然而间充质干细胞在骨髓中含量极少，体外纯化、扩增与成骨诱导是进行骨组织工程研究的关键。 目的：拟建立一套简便可靠的成人骨髓间充质干细胞体外培养及鉴定体系，并定向诱导其向成骨细胞分化。方法：抽取髂前上棘处骨髓，采用密度梯度离心法与贴壁筛选法相结合，对骨髓间充质干细胞分离、纯化、培养并扩增。将地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C配制成骨诱导液，将细胞分为成骨诱导组和空白对照组进行观察。结果与结论：成人骨髓间充质干细胞呈典型的长梭形、纺锤状。8-11 d细胞进入快速增殖期，生长曲线呈S型，CD44、CD90均呈阳性表达，而 CD34、CD45呈阴性表达。碱性磷酸酶活性随培养时间而增高，并在第12天达到高峰，成骨诱导组各时间点碱性磷酸酶活性均高于空白对照组。说明实验建立的成人骨髓间充质干细胞体外培养、鉴定及诱导成骨细胞分化体系可以获得纯度较高、成骨分化能力较好的间充质干细胞。