家兔血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

背景：家兔血清是基础研究中常用的实验样品，双向凝胶电泳是蛋白质组学中最经典的蛋白分离技术，因此建立稳定的家兔血清蛋白质组双向凝胶电泳技术体系非常重要。目的：建立家兔血清蛋白分离的双向凝胶电泳技术体系。设计、时间及地点：单一样本观察，实验于2008—06／07在武警医学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室完成。材料：健康家兔6只，由唐山市职业技术学院动物中心提供。方法：去除高丰度蛋白前后的健康家兔血清样品，分别加入水化上样液使样品中的蛋白充分裂解，还原烷基化后上样，被动水化14h。等电聚焦电泳后进行SDS—PAGE电泳。凝胶银染后用PDQuest7．4软件进行分析。主要观察指标：①高丰度蛋白去除效率。②2一DE图谱。结果：双向电泳图谱清晰。分辨率高，重复性好。未去除高丰度蛋白的血清2-DE图效果优于去除商丰度蛋白后的血清2-DE图。结论：成功建立家兔血清蛋白质双向凝胶电泳技术，将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。