超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的体外标准化实验

背景：超顺磁性氧化铁颗粒标记成像可在体观察标记细胞移植后情况,但结合临床细胞治疗剂量,其标记浓度及标记时间对细胞标记率、标记活性及标记后成像效果的综合影响还需进一步分析。目的：筛选超顺磁性氧化铁体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的标准化剂量,拟为体内成像提供最佳标记“浓度-时间”。设计、时间及地点：细胞学体外对照观察,于2008-02/10在山西医科大学完成。材料：清洁级Wistar大鼠10只,由山西医科大学动物实验中心提供。Resovist中含超顺磁性氧化铁铁颗粒28g/L,为德国Schering公司产品。方法：全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞。取Resovist,分别配制含终浓度为0,25,50,75,100,150mg/L超顺磁性氧化铁的培养基,加入P3代骨髓间充质干细胞中进行孵育标记。主要观察指标：普鲁士蓝法检测细胞标记率,锥虫蓝拒染法检测标记细胞活性,观察标记细胞体外磁共振成像情况。结果：细胞标记率达100%,随着标记时间的延长,胞质内蓝染颗粒逐渐减少。标记1d和3d时,与0mg/L超顺磁性氧化铁组比较,25,50mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异（F=0.28～3.15,P〉0.05）;与25mg/L超顺磁性氧化铁组比较,50mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异（F=0.28～0.79,P〉0.05）。体外磁共振成像示标记3d时,标记浓度为50mg/L组的T2WI及T2＊WI信号降低最明显。结论：超顺磁性氧化铁“50mg/L-3d”体外标记效率高,对细胞活性无影响,且磁共振成像信号降低最明显,为最适“浓度-时间”组合。