氚示踪法评估RNAi介导Mfn2基因沉默对小鼠体内物质代谢的影响

采用同位素示踪技术研究RNAi介导线粒体融合素基因-2（Mfn2）沉默小鼠体内物质代谢变化。构建了含Mfn2短发卡RNA（shorthairRNA，shRNA）干扰质粒和阴性对照质粒。24只BALB／c小鼠分为转染组和阴性对照组，每组各12只，转染组经尾静脉注射Mfn2干扰质粒，对照组注入阴性对照质粒。质粒注入5d后，将氚水（^3H2O）或氚标记葡萄糖（3-^3H—Glucose）经腹腔或尾静脉注射到小鼠体内，留取血标本和组织标本，用液体闪烁计数仪测定标本放射性浓度，计算小鼠组织脂肪酸合成率和肝脏葡萄糖生成率，两组间均数比较采用t检验。结果显示，Mfn2基因转染组小鼠肝脏葡萄糖生成率为49．43±16．31，明显高于阴性对照组的24．91±4．07（P〈0．05），肝脏、肌肉、心脏、脂肪组织的脂肪酸合成率分别为0．10±0．00、9．12±1．90、1．18±0．28、11．11±1．31，显著低于阴性对照组0．79±0．07，70．52±13．95，53．88±9．90，45．43±5．91。以上结果表明，Mfn2基因在体内葡萄糖和脂肪酸代谢中起重要作用。