EZH2过表达在MCF-7获得性耐药中的作用

目的探讨EZH2过表达在MCF-7/ADR获得性耐药中的作用。方法应用荧光定量PCR技术和Westernblot技术分别检测EZH2在MCF-7和MCF-7/ADR中的mRNA和蛋白的相对表达量。将带有报告基因eGFP的EZH2shRNA、EZH2shRNA—scramble质粒分别转染MCF-7/ADR细胞后,用G418筛选获得稳转细胞株,应用荧光定量PCR技术验证EZH2shRNA组EZH2mRNA表达是否被抑制。采用WST-1方法检测EZH2shRNA、EZH2shRNA—scramNe和阴性对照组细胞对阿霉素敏感性的变化情况。结果MCF-7/ADR中EZH2mRNA相对表达量约为MCF...

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Veröffentlicht in:实用肿瘤学杂志 2016, Vol.30 (2), p.123-127
1. Verfasser: 赵玲 贺金奇 白淑平 郭丽 王晓红
Format: Artikel
Sprache:chi
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Beschreibung
Zusammenfassung:目的探讨EZH2过表达在MCF-7/ADR获得性耐药中的作用。方法应用荧光定量PCR技术和Westernblot技术分别检测EZH2在MCF-7和MCF-7/ADR中的mRNA和蛋白的相对表达量。将带有报告基因eGFP的EZH2shRNA、EZH2shRNA—scramble质粒分别转染MCF-7/ADR细胞后,用G418筛选获得稳转细胞株,应用荧光定量PCR技术验证EZH2shRNA组EZH2mRNA表达是否被抑制。采用WST-1方法检测EZH2shRNA、EZH2shRNA—scramNe和阴性对照组细胞对阿霉素敏感性的变化情况。结果MCF-7/ADR中EZH2mRNA相对表达量约为MCF-7的2.52±1.523倍,MCF-7/ADR中EZH2蛋白相对表达量约为MCF-7的1.58±0.58倍,差异均有统计学意义(P〈0.05)。EZH2shRNA组稳转的细胞株EZH2mRNA的抑制率约为84%(P〈0.05),加入阿霉素后细胞增殖能力约下降25%(P〈0.05),而EZH2shRNA—scramble组和阴性对照组加入阿霉素后细胞增殖能力无明显变化。结论在MCF-7/ADR细胞中EZH2mRNA和蛋白的相对表达量较MCF-7细胞高。沉默EZH2的表达有可能逆转MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药性。
ISSN:1002-3070
DOI:10.11904/j.issn.1002-3070.2016.02.006