重大活动食品安全保障中沙门氏菌现场检测方法的建立

目的 针对重大活动食品安全保障工作对于现场检测的时间短和设备简单的要求及供应食品的类型,建立经加热处理和未经加热处理食品的沙门氏菌检测方法.方法 将重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与侧流免疫层析法(lateral flow immunoassay,LFS)结合,建立 RPA-LFS 方法对切片水果样品进行检测,再加上叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)处理,建立PMA-RPA-LFS方法,对熟肉制品进行检测.并通过检测人工污染样品及实际样品验证方法的适用性.结果 RPA-LFS的沙门氏菌纯菌检出限为2.0×101 CFU/mL,新鲜水果基质检出限为2.0×101 CFU/g.对人工污染样品和实际样品的检测结果与GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法的结果一致.PMA-RPA-LFS的PMA处理方法为0.1％脱氧胆酸钠37℃处理20 min,加入10 μg/mL PMA,室温避光孵育10 min,曝光15 min.PMA-RPA-LFS方法的纯菌检出限为2.0×102 CFU/mL,同时可抑制浓度为105 CFU/mL的死菌的扩增.对人工污染样品和实际样品的检测结果与GB 4789.4-2016方法的结果一致.结论 本研究建立的PMA-RPA-LFS能区分沙门氏菌死菌和活菌,适用于经加热处理的食品的检测.RPA-LFS与PMA-RPA-LFS结合使用,能更好地满足不同类型食品类别的检测需求,为重大活动食品安全保障工作中致病菌检测的研究积累数据.